ハス種子蛋白分解酵素に関する研究 : ハス種子蛋白分解酵素の精製法の検討   :   Studies on Lotus Seed Protease : On the Purification of Lotus Protease 

作成者 信濃, 栄, 福島, 和雄, 田村, 五郎
作成者 (ヨミ) シナノ, サカエ, フクシマ, カズオ, タムラ, ゴロウ
作成者の別表記 SHINANO, Sakae, FUKUSHIMA, Kazuo, TAMURA, Goro
日本十進分類法 (NDC) 620
内容 ハス種子プロテアーゼの活性測定条件及び精製法の検討を行つた.(1)6M尿素変性カゼインに対する最適pHは4.0で, この条件下では熱変性のものを基質とした場合に比して, 約4倍の高活性を示した.そこで, 酵素活性の測定は, 尿素処理したものを基質として使用した.(2)ハス種子から抽出した酵素液を, 透析, pH処理, 硫安分画, エタノール分画などで処理し, 前報に於けるSephadex G-100ゲルロ過処理段階のものより精製度において若干高い部分精製酵素標品を得た.(3)更に精製された酵素標品を得るため, DEAEセルロースのクロマト及びバッチ処理, Sephadex G-100及びG-200ゲルロ過, CMセルロースカラムクロマトグラフイー, 澱粉ゾーン電気泳動の検討を行つた.DEAEセルロースバッチ処理及び澱粉ゾーン電気泳動の使用により部分精製標品を精製し, 5倍程精製度を高めることができたが, しかし, この精製酵素はまだ相当の不純蛋白を含むことを認めた.
(1) The lotus seed protease showed the maximum activity at pH 4.0 for 6M urea denatured casein. The degree of hydrolysis for this urea denatured substrate was higher than that for heat denatured substrate (about 4 times). Accordingly, the enzyme assay system, useing urea denatured casein as the substrate, was employed in order to determine the proteolytic activity. (2) The partially purified preparation, obtained by dialysis and pH treatments, and fractional precipitations with ammonium sulfate and ethanol, showed relatively higher purification degree than that of the Sephadex G-100gel filtration state reported in the previous paper. (3) In order to obtain further purified preparation, the purification procedures of chromatography and batch separation on DEAE cellulose, Sephadex-G-100 and G-200gel filtrations, CMcellulose column chromatography, and starch zone electrophoresis, were examined, By uses of DEAE cellulose batch separation and electrophoresis, about 5 folds increase, in specific activity, compared with the partially purified preparation, was obtained. It seems, however, that this purified enzyme was not so homogenous on starch electrophoresis and also on CM cellulose column chromatography.

公開者 千葉大学園芸学部
コンテンツの種類 紀要論文 Departmental Bulletin Paper
DCMI資源タイプ text
ファイル形式 application/pdf
ISSN 0069-3227
NCID AN00142658
掲載誌情報 千葉大学園芸学部学術報告 Vol.13 page.39-44 (19651231)
情報源 The technical bulletin of Faculty of Horticulture, Chiba University
言語 日本語
著者版フラグ publisher

Total Access Count:

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